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飼料粗脂肪的測定方法(索氏提取器脂肪測定儀)

更新時間:2023-07-06  |  點擊率:623

飼料粗脂肪的測定方法(索氏提取器脂肪測定儀)

【教學目標】
1.學會各種飼料樣本的粗脂肪的方法。
2.學會儀器的使用
【教學重點】樣本的測定方法。
【教學方法】操作指導
【課時分配】6學時
【原理】索氏脂肪提取器中用乙mi提取試樣,稱提取物的重量,除脂肪外還有有機酸,磷脂、脂溶性Vit,葉綠素等,因而測定結果稱粗脂肪或乙mi提取物。
【分析步驟】
1)仲裁法使用索氏脂肪提取器測定。
索氏提取器應干燥無水。抽提瓶(內有沸石數(shù)粒)在105℃±2℃烘箱中烘干60min,干燥器中冷卻30min,稱重。再烘干30min,同樣冷卻稱重,兩次重量之差小于0.0008g為恒重。
稱取試樣1~5g(準確至0.0002g),于濾紙筒中,或用濾紙包好,放入105℃±2℃烘箱中,烘干120min(或稱測水分后的干試樣,折算成風干樣重),濾紙筒應高于提取器虹吸管的高度,濾紙包長度應以可全部浸泡于乙mi中為準。將濾紙筒或包放入抽提管,在抽提瓶中加無水乙mi60~100mL,在60~75℃的水浴(用蒸餾水)上加熱,使乙mi回流,控制乙mi回流次數(shù)為每小時約10次,共回流約50次(含油高的試樣約70次)或檢查抽提管流出的乙mi揮發(fā)后不留下油跡為抽提終點。
取出試樣,仍用原提取器回收乙mi直至抽提瓶全部收完,取下抽提瓶,在水浴上蒸去殘余乙mi。擦凈瓶外壁。將抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干120min,干燥器中冷卻30min稱重,再烘干30min,同樣冷卻稱重,兩次重量之差小于O.OOlg為恒重。
2)結果計算


式中:m ——風干試樣重量,g。
m1 ——已恒重的抽提瓶重量,g。
m2——己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量,g。
3)推薦法
⑴魯氏殘留法
①操作步驟
a.將脫脂濾紙裁成10×10cm2大小,疊成一邊不封口的紙包,用鉛筆編號,按順序排列于培養(yǎng)皿上,置于105℃土2℃烘箱中烘2h,取出放于干燥器中冷卻至室溫,分別放入同一稱量瓶中稱重(m0,g)。
b.將2~5g風干樣品(通過40目篩)用小藥匙小心裝入已經稱重的紙包中,封上包口。
按順序排列于培養(yǎng)皿中。置于105℃±2℃烘箱中烘3h,取出放入干燥器中冷卻至室溫,分別放入原稱量瓶中,稱至恒重(m1,g)。將樣品包放入抽提管中,倒入無水乙mi,使之剛超過樣品包高度,浸泡過夜。然后將浸泡過樣品的無水乙mi放入抽提瓶中,再重新向抽提管中倒入無水乙mi,使之浸沒樣品包。連接裝置,接通冷凝水,在70~80℃水浴鍋中回流6~8h,回流速度以每分鐘20mL左右為宜。抽提完畢,取出樣品包,在通風處揮干乙mi.剩余乙mi可進行回收。
c.將樣品包仍按原序號排列在培養(yǎng)皿中,置于105℃±2℃烘箱中烘2h,取出放入干燥器中冷卻至室溫,再將樣品包放原稱量瓶中,稱至恒重(m2,g)。
②結果計算
粗脂肪= m1-m2×100%
m1-m0
式中,m0——濾紙+稱量瓶重(g);
m1——提取前樣品包+稱量瓶重(g);
m2——提取后樣品包+稱量瓶重(g)。
上述兩種方法都是以乙mi為溶劑的提取方法,其優(yōu)點是具有較好的準確度和精密度,尤其是測定粗脂肪含量在5%以下的樣品,用此法比較可靠。缺點是費工費時,反復提取需8~16h;另外乙mi不能將樣品中的全部脂肪提盡。這是因為部分脂肪常與蛋白質或碳水化合物等非脂肪成分結合。成為結合態(tài)脂類,如脂蛋白、糖脂、磷酯等,同時樣品也是烘干的,因乙mi難以滲入含水樣品的組織內部。在烘干樣品時,又應考慮到脂肪在高溫下易被空氣氧化等情況。
⑵脂肪測定儀
①操作步驟
a.打開恒溫加熱裝置開關,控制工作溫度為75℃。
b.用萬分之一分析天平稱2g左右的樣品(準確至0.0002g) (m1),放入濾紙筒內烘干。
c.用套筒夾將6個濾紙?zhí)淄惭b入浸提冷凝管內,當確信套筒已被磁鐵吸牢后取下套簡夾。
d.用分析天平稱浸提杯重量(m2),然后加入約50mL無水乙mi,用杯托將6個浸提杯放在加熱板上,再將冷凝管提升機構搬下,使浸提懷與冷凝管連接好。
e.事先接通浸提冷凝管的冷卻水,將濾紙筒置于“沸騰"位置。冷凝管應有良好的冷凝作用;
f.無水乙mi沸騰15min或30min(依樣品含油量而異)后,將濾紙筒提升到“沖洗"位置,沖洗30min或45min。
g.沖洗結束后,關閉冷凝管旋塞閥,回收乙mi。
h.松開冷凝管提升機構,取下浸提杯,并放入烘箱烘干。
i.在干燥器中冷卻浸提杯,然后用分析天平稱重(m3)。
j.按以下公式計算樣品中粗脂肪含量。
②測定結果的計算
粗脂肪=W3-W2×100%
W1
式中 :W1——風干試樣重量,g。
W2 ——已恒重的浸提杯重量,g。
W3——己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量,g。
6.3.3.7 重復性每個試樣取兩平行樣進行測定,以其算術平均值為結果。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允許相對偏差為3%。粗脂肪含量在10%以下時,允許相對偏差為5%。
【實訓作業(yè)及思考題】
1.測定混合飼料、配合飼料、濃縮飼料或單一飼料中粗脂肪的含量,并寫出實訓報告。
2.脂肪包的高度超過虹吸高度對測定結果有何影響?為什么?
3.脂肪測定儀對飼料脂肪的測定有何優(yōu)點?
4.對測定Z后放入105℃±2℃烘箱中需干燥的包、瓶或杯有何要求?
5.測定Z后包、瓶或杯在105℃±2℃烘箱內的干燥時間為什么不能過長?過長是否會影響測定結果?